ABSTRACT
The purpose of this study was to investigate the effects of porcine interleukin (IL)-2 and IL-4 genes on enhancing the immunogenicity of a porcine reproductive and respiratory syndrome virus ORF5 DNA vaccine in piglets. Eukaryotic expression plasmids pcDNA-ORF5, pcDNA-IL-2, and pcDNA-IL-4 were constructed and then expressed in Marc-145 cells. The effects of these genes were detected using an indirect immunofluorescent assay and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Characteristic fluorescence was observed at different times after pcDNA-ORF5 was expressed in the Marc-145 cells, and PCR products corresponding to ORF5, IL-2, and IL-4 genes were detected at 48 h. Based on these data, healthy piglets were injected intramuscularly with different combinations of the purified plasmids: pcDNA-ORF5 alone, pcDNA-ORF5 + pcDNA-IL-2, pcDNA-ORF5 + pcDNA-IL-4, and pcDNA-ORF5 + pcDNAIL-4 + pcDNA-IL-2. The ensuing humoral immune responses, percentages of CD4+ and CD8+ T lymphocytes, proliferation indices, and interferon-gamma expression were analyzed. Results revealed that the piglets co-immunized with pcDNA-ORF5 + pcDNA-IL-4 + pcDNA-IL-2 plasmids developed significantly higher antibody titers and neutralizing antibody levels, had significantly increased levels of specific T lymphocyte proliferation, elevated percentages of CD4+ and CD8+ T lymphocytes, and significantly higher IFN-gamma production than the other inoculated pigs (p < 0.05).
Subject(s)
Animals , Cell Line , Escherichia coli/genetics , Haplorhini , Immunity, Cellular , Interleukin-2/genetics , Interleukin-4/genetics , Neutralization Tests/veterinary , Plasmids , Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome/prevention & control , Porcine respiratory and reproductive syndrome virus/immunology , Recombinant Proteins/genetics , Swine , Vaccines, DNA/immunology , Viral Envelope Proteins/genetics , Viral Vaccines/immunologyABSTRACT
A síndrome reprodutiva e respiratória dos suínos (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) é uma doença relativamente nova dos suínos que foi detectada primeiramente em 1985 nos Estados Unidos, e em 1990 no continente Europeu. A síndrome é causada pelo PRRS vírus (PRRSV), o qual foi incluído em uma nova família de vírus, a Arteriviridae. A infecçäo pelo PRRSV causa problemas reprodutivos em fêmeas gestantes, o quais säo caracterizados por abortos no final da gestaçäo e/ou parto precoce, onde pode-se observar um elevado número de fetos mumificados e natimortos; leitöes que nascem infectados säo fracos e economicamente inviáveis. Os problemas respiratórios causados pela infecçäo pelo PRRSV podem se manifestar em suínos de todas as faixas etárias, e säo semelhantes a influenza. Embora PRRS tem sido detectada na maioria dos países em que a suinocultura tem importância econômica significativa, näo há informaçöes publicadas a respeito da doença ou do vírus no Brasil. No entanto, devido as perdas econômicas significativas que essa síndrome causou nos países já afetados, e da possibilidade do vírus ser eventualmente introduzido nos rebanhos brasileiros, é necessário reconhecer a doença imediatamente, e tomar as devidas medidas para o diagnóstico e controle em casos de surtos de problemas reprodutivos e respiratórios.